食源性病菌大肠杆菌 O157:H7 快速检测卡

产品编号 EC-IG-02

标准依据

GBT 4789.36-2008：《食品卫生微生物学检验 大肠埃希氏菌 O157：H7NM 检验》

检测原理

基于双抗体夹心法的胶体金免疫层析技术。

包装规格

50T/管。内含金标检测卡、增敏液、干燥剂，可拆卸反应微孔板,说明书

特异性

表1 本检测卡经过以下致病菌的交叉反应测试

致病菌 交叉反应 致病菌 交叉反应

金黄色葡萄球菌 ATCC 29213 － 宋内氏志贺氏菌 ATCC 25931 －

金黄色葡萄球菌 ATCC 27660 － 痢疾志贺氏菌 －

出血性大肠杆菌 O157ATCC43895 ＋ 鲍氏志贺氏菌 ATCC 9207 －

出血性大肠杆菌 O157ATCC43889 ＋ 鲍氏志贺氏菌 CMCC 51346 －

单核细胞增生李斯特菌 ATCC 43251 － 副溶血性弧菌 ATCC 17802 －

单核细胞增生李斯特菌 ATCC 13932 － 阪崎肠杆菌 ATCC 29004. －

单核细胞增生李斯特菌 ATCC 19112 － 阪崎肠杆菌 ATCC 29554 －

单核细胞增生李斯特菌 ATCC 19114 － 阪崎肠杆菌 ATCC 12868 －

单核细胞增生李斯特菌 ATCC 19116 － 小肠结肠炎耶尔森氏菌 ATCC 23715 －

单核细胞增生李斯特菌 ATCC 19117 － 小肠结肠炎耶尔森氏菌 CMCC 52207 －

单核细胞增生李斯特菌 ATCC 19115 － 肺炎链球菌 ATCC 10373 －

猪霍乱沙门氏菌 CICC 21493 － 化脓性链球菌 ATCC 19615 －

鼠伤寒沙门氏菌 CICC 22956 － 肠炎沙门氏菌 ATCC 13076 －

鼠伤寒沙门氏菌 ATCC 14028 － 福氏志贺氏菌 ATCC 12022 －

大肠杆菌 O97 － 大肠杆菌 O100 －

大肠杆菌 O149 － 大肠杆菌 O91 －

大肠埃希氏菌 ATCC 8739 － 大肠埃希氏菌 NCTC 12900

－

－ －

大肠埃希氏菌 ATCC 25922 － 大肠埃希氏菌8099 －

大肠埃希氏菌 CMCC(B)44102 －

检测样品处理

样品处理参考国标 GB/T 4789.36-2008 进行。即以无菌操作取检样 25g（ml），加入到含有 225ml的mEC+n肉汤培养基的均质袋中，在拍击式均质器上连续均质1-2min；或放入盛有225ml的 mEC+n肉汤的均质杯中，8000-10000r/min均质1-2min，置于36℃±1℃培养（18-24h）后，混 匀。增菌完成后，取50ml增菌液于试管中，100℃水浴加热10分钟后冷却至室温。

操作步骤

1、打开大肠杆菌 O157:H7 胶体金筒状包装，取出所需的的数量检测卡，恢复至室温（20℃～30℃）；

2、将上述培养完后的菌液加入 100μL 到微孔中，然后加入 100μL 增敏液，混匀，将检测卡插 入微孔，待液体层析至吸水垫时即可观察实验结果并判定。一般判读实验结果不超过 2 分钟。

结果判定：阳性：C 线显色，T 线肉眼可见，无论颜色深浅均判为阳性。 阴性：C 线显色，T 线不显色，判为阴性。无效：C 线不显色，无论 T 线是否显色，该试均判为无效。

结果确认：若结果为阳性，请按照《大肠埃希氏菌O157：H7NM检验》（GB/T 4789.36-2008）进行确认。可用样品增菌液进行确认。

注意事项

1、请勿使用过期的检测卡。

2、所有接触疑似污染的食品样本的物品均应合理处理，以免污染实验室。

3、本公司提供的试剂请勿食用。

4、严格的按照操作说明可以获得最好的结果。操作过程中移液、定时等全部过程必须精确。

贮存条件

2-8℃避光保存，避免日光暴晒，切勿冷冻。

有效期 12 个月

生产日期及批号 详见外包装袋。

培养基组分

附：改良 EC 肉汤（mEC+n）

1、 培养基组分：

胰蛋白胨                              20.0 g

3号胆盐                              1.12 g

乳糖                                   5.0 g

磷酸氢二钾（K2HPO4•7H2O）           4.0 g

磷酸二氢钾(KH2PO4)                    1.5 g

氯化钠（NaCl）                          5.0 g

新生霉素钠盐溶液（20 mg/ml）          1.0 mL

蒸馏水                              1000.0 mL

pH 6.9±0.1

2、配制

除新生霉素外，所有成分溶解在水中加热煮沸，在 20℃-25℃下调 pH 至 6.9±0.1，分装，121℃ 高压灭菌 15min 备用。制备浓度为 20mg/ml 的新生霉素储备液溶液，过滤除菌，待培养基温度 冷却至 50℃以下时，按 1000 mL 培养基内加 1mL 新生霉素储备液，使最终浓度为 20 mg/L。